CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班2020(2月北京班)
时间:2020-02-22 09:00 至 2020-02-23 17:00
地点:北京
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CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班2020(2月北京班) 已截止报名
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会议内容 主办方介绍
CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班2020(2月北京班)宣传图
CRISPR是继RNA干扰技术、高通量测序技术等之后生物科学发展历史上最具颠覆性技术之一,使用高效、迅速且简单,在生物医学研究领域引起一场巨变,并因此成为生物医学实验室常规技术。随着CRISPR基因治疗临床实验的初步成功,以及2018年的基因编辑婴儿事件预热,CRISPR技术被越来越多的研究人员用来改造人类基因以消除疾病,创造生命力更加顽强的植物,消灭病原体等。在过去的7年中CRISPR技术斩获了生命科学领域各种重量级奖项,包括生命科学突破奖,盖尔德纳国际奖等,《Science》年度突破、《Nature》年度人物均授予了CRISPR单碱基基因编辑技术的突破,2019年9月,北京大学邓宏魁组完成世界首例基因编辑治疗艾滋病和白血病,使CRISPR技术再一次成为生命科学的焦点。
随着近几年的发展,研究者开发出越来越多基于CRISPR的新型基因编辑技术,例如CRISPR转录激活/抑制技术,基因定位,表观遗传修饰,单碱基基因编辑系统(BE2,BE3,ABE等),CRISPR基因突变检测系统(Sherlock、DETECTR),无修复模板基因敲入技术等。CRISPR/Cas9系统的应用更加便捷、高效,也更广泛,目前该技术成功应用于人类细胞、斑马鱼、小鼠以及细菌等基因组精确修饰,成为科研人员的强大工具,基于CRISPR临床实验已经取得初步成功。
为了让更多的科研人员及时全面的掌握CRISPR最新技术,并应用的相应的领域研究中。特于2020年2月22日至23日在北京举办CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班。在带教教师的指导下,学员独立完成一系列全部实验,免费获得三份CRISPR/Cas9敲除质粒载体(可以用于哺乳动物、植物、真菌、细菌、斑马鱼、线虫等,共60种)。免费赠送sgRNA离线设计软件(有基因组DNA序列即可设计!)
举办地点:
北京市西城区德外大街11号康华伟业孵化器A325-A343(近北京师范大学)
参加对象
从事医学、生命科学、农学等领域科研工作者和高校教师及研究生。
授课方式
1.理论讲授。
2.每位学员在辅导教师的指导下,独立完成实验操作。(可选)
CRISPR 质 粒 清 单 |
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Plant |
#50588 |
pHSN401 |
CRISPR/Cas based plant genome editing and gene regulation; expresses 3×FLAG-NLS-zCas9-NLS, gRNA scaffold for insertion of target sequence (AtU6-26 promoter), Hyg resistance |
#63142 |
pRGEB32 |
(Empty Backbone) Express sgRNA/PTG with rice snoRNA U3 promoter and Cas9 with rice ubiquitin promoter for Agrobacterium-mediated transformation. |
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#51295 |
pRGEB31 |
(Empty Backbone) Binary vector derived from pRGE31. Deliver sgRNA and Cas9 into plant. by agrobacterium mediated transformation. |
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Insect |
#49330 |
pAc-sgRNA-Cas9 |
Expresses sgRNA and Cas9-Puro in Drosophila S2 cells |
C.elegans |
#47549 |
pDD162 |
Cas9 + sgRNA plasmid that can be modified to cleave any Cas9 target site in the C. elegans genome. |
Yeast Bateria |
#43804 |
p415 |
Human Optimized S. pyogenes Cas9 |
#42875 |
pCRISPR |
A crRNA expression plasmid for targeting a specific sequence |
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#84379 |
pRH2502 |
Expression of dcas9 D10A H840A from a TetR-regulated uvtetO promoter |
#84380 |
pRH2521 |
Expression of sgRNA from a imyc promoter (Pimyc) |
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#61737 |
pCRISPomyces-2 |
Streptomyces expression of codon-optimized Cas9 and custom gRNA |
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#42876 |
pCas9 |
Bacterial expression of Cas9 nuclease, tracrRNA and crRNA guide |
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Zebrafish |
#47929 |
pCS2-nCas9n |
expression of an optimized Cas9 for genome-editing in zebrafish |
Mammalian
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#52970 |
FokI-dCas9 |
Expresses Fok1 nuclease domain fused to catalytically inactive Cas9 DNA-binding domain in mammalian cells |
#61591 |
PX601 |
A single vector AAV-Cas9 system containing Cas9 from Staphylococcus aureus (SaCas9) and its sgRNA. |
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#42229 |
PX260 |
This plasmid separately encodes a human codon-optimized SpCas9, a tracrRNA and customizable crRNA. |
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#42230 |
PX330 |
A human codon-optimized SpCas9 and chimeric guide RNA expression plasmid. |
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#48138 |
PX458[GFP] |
Cas9 from S. pyogenes with 2A-EGFP, and cloning backbone for sgRNA |
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#48139 |
PX459[Puromycin] |
Cas9 from S. pyogenes with 2A-Puro, and cloning backbone for sgRNA (V2.0) |
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#48140 |
PX461 |
Cas9n (D10A nickase mutant) from S. pyogenes with 2A-EGFP, and cloning backbone for sgRNA |
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#48141 |
PX462[Cas9n,Puromycin] |
Cas9n (D10A nickase mutant) from S. pyogenes with 2A-Puro, and cloning backbone for sgRNA |
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#50661 |
pCW-Cas9[Tet-on,Puromycin] |
Inducible lentiviral expression of SpCas9 |
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#52963 |
LentiGuide-puro-Vector |
Expresses S. pyogenes CRISPR chimeric RNA element with customizable sgRNA from U6 promoter and puromycin resistance from EF-1a promoter. Lentiviral backbone. |
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#52962 |
lentiCas9-Blast |
Expresses human codon-optimized S. pyogenes Cas9 protein and blasticidin resistance from EFS promoter. 3rd generation lentiviral backbone. |
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#69982 |
pY010 (pcDNA3.1-hAsCpf1) |
Expresses humanized AsCpf1 |
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#19319 |
pLJM1-EGFP |
(Empty Backbone) 3rd gen lentiviral vector for EGFP fusion; PGK driven puromycin |
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#12259 |
pMD2.G |
VSV-G envelope expressing plasmid |
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#12260 |
psPAX2 |
Lentivirus package plasmids |
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#61427 |
lenti sgRNA(MS2)_zeo backbone |
(Empty Backbone) 3rd generation lenti sgRNA cloning backbone with MS2 loops at tetraloop and stemloop 2 and EF1a-zeo resistance marker. Contains BsmBI sites for insertion of spacer sequences. |
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#61426 |
lenti MS2-P65-HSF1_Hygro |
lenti vector encoding the MS2-P65-HSF1 activator helper complex with a 2A Hygro resistance marker (EF1a-MS2-p65-HSF1-2A-Hygro-WPRE) |
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#61425 |
|
3rd generation lenti vector encoding dCAS9-VP64 with 2A Blast resistance marker (EF1a-NLS-dCas9(N863)-VP64-2A-Blast-WPRE) |
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#71814 |
eSpCas9(1.1) |
Expresses high specificity SpCas9. Px330-like plasmid. |
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#47327 |
pET-28b-Cas9-His |
For in vitro expression and purification of Cas9 protein |
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#62934 |
pET-NLS-Cas9-6xHis |
Expression of NLS-Cas9-6xHis in bacterial cells |
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86840 |
pJH373 |
mamalian expression of AcrIIA2 |
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84750 |
Lenti-AsCpf1-Blast |
Expresses human codon-optimized AsCpf1 protein and blasticidin resistance from EFS promoter. Lentiviral backbone. |
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84752 |
Lenti_gRNA-Puro |
(Empty Backbone) Expresses Cpf1 customizable sgRNA from U6 promoter and puromycin resistance from EF-1a promoter |
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79145 |
pCAG-eCas9-GFP-U6-gRNA |
All-in-one CRISPR/Cas9 vector with high-fidelity eSpCas9 expression in human pluripotent stem cells |
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84745 |
pY30 |
Expresses huAsCpf1-P2A-puro and crRNA guide |
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84743 |
pY094 |
Expresses huAsCpf1-T2A-GFP and crRNA guide |
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84741 |
pY026 |
Expresses huAsCpf1 and crRNA guide |
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60958 |
PX552 |
pAAV-U6sgRNA(SapI)_hSyn-GFP-KASH-bGH (SpGuide acceptor). AAV plasmid for sgRNA cloning. GFP-KASH fusion facilitates FACS sorting of cells and nuclei. |
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79152 |
pC003 - LshC2C2 locus into pACYC184 for spacer cloning |
LshC2c2 locus in pACYC184 with BsaI sites for spacer cloning |
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79150 |
pC001 - huLshC2C2-MBP for bacterial expression |
Expresses human codon-optimized LshC2c2 for purification in E. coli |
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64324 |
pU6-(BbsI)_CBh-Cas9-T2A-mCherry |
Expression vector for sgRNAs cloned into the BbsI sites and for expression of Cas9 linked to mCherry via a T2A peptide |
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64222 |
pU6-(BbsI)_CBh-Cas9-T2A-mcherry-P2A-Ad4E4orf6 |
Expression vector for sgRNA and for Expression of Cas9 linked via T2A to mCherry linked to the Ad4 E4orf6 gene via P2A |
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64218 |
pU6-(BbsI)_CBh-Cas9-T2A-BFP-P2A-Ad4E1B |
Expression vector for sgRNA and for Expression of Cas9 linked to BFP via T2A linked to Ad4 E1B via P2A |
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64323 |
pU6-(BbsI)_CBh-Cas9-T2A-BFP |
Expression vector for sgRNAs cloned into the BbsI sites and for expression of Cas9 linked to BFP via a T2A peptide |
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51023 |
pSLQ1658-dCas9-EGFP |
Template for NLS-dCas9-NLS-EGFP fusion protein for CRISPR imaging (the recipient vector can be TetON 3G promoter system) |
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64108 |
pHAGE-TO-dCas9-3XmCherry |
Expression of Sp dCas9-3XmCherry in mammalian cells |
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60957 |
PX551 |
pAAV-pMecp2-SpCas9-spA (AAV-SpCas9). AAV plasmid expressing Cas9 in neurons under control of truncated mecp2 promoter. |
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100806 |
BE4-Gam |
Expresses BE4-Gam in mammalian cells |
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100809 |
SaBE4-Gam |
Expresses SaBE4-Gam in mammalian cells |
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102917 |
pCMV-ABE7.8 |
expresses ABE7.8 in mammalian cells |
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102919 |
pCMV-ABE7.10 |
expresses ABE7.10 in mammalian cells |
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108382 |
xCas9(3.7)-ABE(7.10) |
Mammalian expression vector for xCas9(3.7)-ABE |
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公司主营业务为通过基因检测、质谱检测、生物信息分析等手段,为医疗机构、科研机构、企事业单位等提供基因组学类的检测和研究服务。微旋基因秉承“基因科技造福人类”的愿景,以推动生命科学研究进展、生命大数据应用和提高全球医疗健康水平为出发点,基于基因领域研究成果及精准检测技术在民生健康方面的应用,致力于加速科技创新,减少出生缺陷,加强肿瘤防控,抑制重大疾病对人类的危害,实现精准治愈感染,全面助力精准医学。 公司主要服务于国内外的科研院校、研究所、独立医学检验实验室、制药公司等机构, 以及国内外的各级医院、体检机构等医疗卫生机构、公司客户和大众客户。目前,公司业务已经覆盖了上百家医疗机构,其中三甲医院30多家一直与我们保持着量好的业务和科研合作,与各个地区合作的海内外医疗和科研机构超过100家。 公司致力于基因技术的临床应用,细胞治疗和药物研发,汇聚了来自国内外医学、分子生物学、基因组学、生物信息学、计算机科学等各个领域的专业技术人才。
会议日程 (最终日程以会议现场为准)
日期 |
时间 |
培训内容 |
2月22日 |
8:00-8:50 |
培训报到 |
2月22日 |
9:00-11:30 |
理论讲解: 一、基因编辑技术简介(三代基因编辑工具) 1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR 二、CRISPR/Cas9基因编辑技术原理 1. CRISPR/Cas9发现历史 2. CRISPR/Cas9作用机制解析 3. CRISPR/Cas9系统改造策略 |
13:00-17:00 |
理论讲解: 一、sgRNA在线设计构建实战演练(1.靶基因序列查找2.sgRNA在线设计合成) 二、CRISPR/Cas9转染策略: 1.生物转染(慢病毒、腺相关病毒等) 2.物理转染 (电转核酸/RNP、显微注射、基因枪) 3.化学转染 (脂质体、阳离子聚合物) 三、CRISPR/Cas9 sgRNA效率检测,脱靶检测及解决策略 1、高保真Cas9(espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9) |
|
2月23日 |
9:00-11:30 |
理论讲解: 一、CRISPR技术应用解析 1.基因敲除(单基因敲除、多基因敲除、大片段删除、多靶点sgRNA载体构建策略) 2.基因敲入实战演练(gRNA选择、同源臂设计、导入,长片段导入策略/提高基因敲入效率策略,PITCh、HITI、CRISPR-转座酶高效基因敲入系统) 3.CRISPR在转录调控中的应用(转录激活、转录抑制系统) 4.CRISPR靶基因标记定位 二、CRISPR案例解析 1.基因敲除在小鼠模型构建、植物、细胞、细菌、真菌等中的应用案例解析 2.基于CRISPR的全基因组基因敲除高通量筛选策略(文库构建,选择,流程优化等) 3.基于CRISPR的全基因组转录激活/抑制高通量筛选策略(文库构建,选择,流程优化等) 三、CRISPR/Cas9与基因沉默技术(siRNA、shRNA)系统比较。 |
13:00-17:00 |
理论讲解: 一、单碱基基因编辑技术简介及在基因治疗中的应用 1.HF2-BE2 2.BE3系统 3.ABE系统4.单碱基基因编辑脱靶克服。 二、基因CRISPR的基因检测系统 1、CRISPR-Cas12a系统介绍(DETECTR) 2、CRISPR-Cas13a系统介绍(SHERLOCK-多重病原菌检测) 三、CRISPR/Cas9系统在肿瘤和遗传病治疗中应用解析 1、CRISPR结合免疫检查点抑制剂治疗肿瘤 2、单基因遗传病治疗(DMD、先天性黑朦、地中海贫血等) 3、CRISPR治疗HIV-基因编辑婴儿解析 4、CRISPR治疗HIV炎性白血病病例解析 四、新一代无模板基因敲入系统解析 1. 1、CRISPR Primer-editing 基因敲入原理及应用 |
日期 |
时间 |
培训内容 |
2月23日 |
18:00 |
实验操作:CRISPR/Cas9敲除质粒转染靶细胞 |
2月24日 |
9:00-11:30 |
实验操作:一、CRISPR/Cas9基因表达载体克隆构建1.sgRNA设计合成 2.敲除载体选择及线性化 3.sgRNA连接,转化等
|
13:00-17:00 |
实验操作: 1.CRISPR/Cas9转染后靶DNA检测 2.靶基因修饰位点扩增及鉴定 3. CRISPR基因敲除效果检测
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会议嘉宾 (最终出席嘉宾以会议现场为准)
刘刚博士
2008年博士毕业于中国科学院上海生命科学研究院,从事肿瘤干细胞,细胞衰老,肿瘤转移等细胞作用网络和通路的研究,并作为骨干研究人员参加了973计划项目、国家自然科学基金重点项目、在香港中文大学做为作为Postdoc和Research fellow,从事研究工作。先后Nature Genetics,cell research、PLOS one等期刊发表论文十余篇。
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参会指南
会议门票 场馆介绍
注册费:3200元/人,
2020年2月13号之前汇款报名可以优惠至:3000元/人。
实验操作课程需加500元/人。同一个单位三个人以上报名可以免费构建价值1500元的质粒一个;包括学费、资料费、试剂耗材费、其他材料费;免费提供工作午餐,住宿用自理。
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温馨提示
酒店与住宿:
为防止极端情况下活动延期或取消,建议“异地客户”与活动家客服确认参会信息后,再安排出行与住宿。
退款规则:
活动各项资源需提前采购,购票后不支持退款,可以换人参加。
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