三、培训内容：

一）重组蛋白药和发酵概述

1、重组蛋白药的发展历史及现状

2、重组蛋白药的表达系统

3、发酵工艺的基本概念

4、相关工艺设备和发酵工艺的操作模式

二）大肠杆菌重组蛋白发酵

1、菌株构建知识简介

1.1 合适的宿主选择：B系列与K系列

1.2 多样的表达载体：pET, pQE, pBAD, pUC

1.3 不同的诱导方式：IPTG、温度、阿拉伯糖

1.4 改进大肠杆菌蛋白表达的最新分子生物学技术（重点：分子生物学）

2、小试发酵工艺的开发

2.1 常用培养基的选择

2.2 （培养条件（PH、温度、溶氧、补料等）的优化）重点

2.3 高通量筛选技术与设备（重点：筛选）

4、大肠杆菌发酵工艺放大策略

4.1 发酵工艺放大带来的问题解决(生产曲线与产量；培养基和补料优化等)

4.2 发酵工艺放大需遵循的一般原则，典型的大尺度发酵流程（重点：放大、原则）

4.3 大尺度发酵工艺参数的再确定与优化 （重点：工艺参数）

4.4 各阶段工艺变更计划

三）毕赤酵母重组蛋白发酵

1、毕赤酵母表达系统简介

1.1 AOX1启动子

1.2 分泌表达

1.3 密码子优化

1.4 基因拷贝数

2、毕赤酵母发酵工艺开发方法及放大策略

2.1 常用培养基介绍，一般的补料分批发酵流程

2.2 发酵工艺参数（温度、PH、溶氧、搅拌、OD、补料等）的影响及优化方法（重点：工艺参数、优化方法）

2.3 发酵工艺放大需重点解决的问题策略（重点）

3、发酵过程控制

3.1 发酵过程数据监测的新进展

3.2 发酵动力学模型的建立与应用（重点：动力学模型）

3.3 过程参数的控制与优化 （重点：过程参数）

3.4 放大考量要素

4、毕赤酵母高密度发酵的补料调控策略探讨

四）QbD理念指导的发酵实验设计方法（DOE）与实施

3.1 什么是QbD

3.2 不同生命周期阶段的QbD

3.3 目标产品质量概况、关键质量属性的概念与案例（重点：目标产品质量概况、关键质量属性）

3.4 设计空间和控制策略 （重点）

3.5 什么是DOE

3.6 DOE的流程

3.7 实验设计的基本原则与常用类型

3.8 稳健参数设计的设计方法与发酵实验中的应用（重点：稳健参数设计的设计方法）

五）重组蛋白发酵难点问题与展望

1、重组蛋白发酵过程易发问题（重点：易发问题）

2、GMP体系下发酵工艺开发、各阶段工艺变更计划及生产

3、噬菌体污染的防治

4、下游工艺衔接

5、商业化生产模式下的思考(重点：IPAT、不同工艺配置、工厂的设计)